Kultur Jaringan

Ingin tahu lebih lanjut tentang apa yang dimaksud dengan kultur jaringan? berikut penjelasannya teman-teman sekalian. cekidot.

istilah-istilah yang ada dalam kultur jaringan.

1. aseptik: kondisi bebas kuman

2. antiseptik: tindakan untuk membunuh kuman

sterilisasi: proses membunuh kuman sampai ke sporanya.

STERILISASI

sterilisasi uap (basa): dilakukan dengan autoklaf menggunakan uap air
s. panas kering: menggunkan oven untuk pemanasan
s. dengan penyaringan: menggunakan penyaringn khusus, dengan tekanan setrifugasi
s. gas: menggunakan pemaparan gas untuk membunuh kuman sampai sporanya
s. radiasi: menggunakan radiasi seperti UV.

ALAT YANG BIASANYA DIPAKAI DALAM PROSES KULTUR JARINGAN

petridishk: media pemotongan (cawan petri)
botol kultur: untuk menaruh dlm penanaman eksplan
erlenmeyer: alat untuk pencucian
scalpel: untuk memotong eksplan
pinset: untuk mengambil eksplan
aluminium foil: untuk membungkus botol kultur.

Kultur jaringan/Kultur In Vitro/Tissue Culture adalah suatu teknik untuk mengisolasi, sel, protoplasma, jaringan, dan organ dan menumbuhkan bagian tersebut pada nutrisi yang mengandung zat pengatur tumbuh tanaman pada kondisi aseptik,sehingga bagian-bagian tersebut dapat memperbanyak diri dan beregenerasi menjadi tanaman sempurna kembali.

Dasar Teori Kultur Jaringan

a. Sel dari suatu organisme multiseluler di mana pun letaknya, sebenarnya sama dengan sel zigot karena berasal dari satu sel tersebut (Setiap sel berasal dari satu sel).

b. Teori Totipotensi Sel (Total Genetic Potential), artinya setiap sel memiliki potensi genetik seperti zigot yaitu mampu memperbanyak diri dan berediferensiasi menjadi tanaman lengkap.

Aplikasi Teknik Kultur Jaringan dalam Bidang Agronomi

a. Perbanyakan vegetatif secara cepat (Micropropagation).

b. Membersihkan bahan tanaman/bibit dari virus

c. Membantu program pemuliaan tanaman (Kultur Haploid, Embryo Rescue, Seleksi In Vitro, Variasi Somaklonal, Fusiprotoplas, Transformasi Gen /Rekayasa Genetika Tanaman dll).

d. Produksi metabolit sekunder.

Faktor-Faktor yang Mempengaruhi Regenerasi

1. Bentuk Regenerasi dalam Kultur In Vitro : pucuk aksilar, pucuk adventif, embrio somatik, pembentukan protocorm like bodies, dll

2. Eksplan

Eksplan adalah bagian tanaman yang dipergunakan sebagai bahan awal untuk perbanyakan tanaman. Faktor eksplan yang penting adalah genotipe/varietas, umur eksplan, letak pada cabang, dan seks (jantan/betina). Bagian tanaman yang dapat digunakan sebagi eksplan adalah pucuk muda, batang muda, daun muda, kotiledon, hipokotil, endosperm, ovari muda, anther, embrio, dll.

3. Media Tumbuh

Di dalam media tumbuh mengandung komposisi garam anorganik, zat pengatur tumbuh, dan bentuk fisik media. Terdapat 13 komposisi media dalam kultur jaringan, antara lain: Murashige dan Skoog (MS), Woody Plant Medium (WPM), Knop, Knudson-C, Anderson dll. Media yang sering digunakan secara luas adalah MS.

Komposisi media Murashige dan Skoog (MS)

___________________________________________________

Bahan Kimia Konsentrasi Media (mg/l)

___________________________________________________

1. NH4NO3 1650

2. KNO3 1900

3. CaCL2.2H20 440

4. MgSO4.7H20 370

5. KH2PO4 170

6. FeSO4.7H20 27

7. NaEDTA 37,3

8. MnSO4.4H20 22,3

9. ZnSO4.7H2O 8,6

10. H3BO3 6,2

11. KI 0,83

12. Na2MoO4.2H20 0,25

13. CuSO4.5H20 0,025

14. CoCl2.6H20 0,025

15. Myoinositol 100

16. Niasin 0,5

17. Piridoksin-HCL 0,5

18. Tiamin -HCL 0,1

19. Glisin 2

20. Sukrosa 30.000

____________________________________________________

4. Zat Pengatur Tumbuh Tanaman

Faktor yang perlu diperhatikan dalam penggunaan ZPT adalah konsentrasi, urutan penggunaan dan periode masa induksi dalam kultur tertentu. Jenis yang sering digunakan adalah golongan Auksin seperti Indole Aceti Acid(IAA), Napthalene Acetic Acid (NAA), 2,4-D, CPA dan Indole Acetic Acid (IBA). Golongan Sitokinin seperti Kinetin, Benziladenin (BA), 2I-P, Zeatin, Thidiazuron, dan PBA. Golongan Gibberelin seperti GA3. Golongan zat penghambat tumbuh seperti Ancymidol, Paclobutrazol, TIBA, dan CCC.

5. Lingkungan Tumbuh

Lingkungan tumbuh yang dapat mempengruhi regenerasi tanaman meliputi temperatur, panjang penyinaran, intensitas penyinaran, kualitas sinar, dan ukuran wadah kultur.